总有机碳分析仪​有机械方法

发表时间:2017-03-23 阅读次数:

      缓冲液在磨样的时候只加一小部分,其他的就是在磨完后冲洗匀浆器的 如, 最常用的匀浆介质为等渗的蔗糖(0.25mol/L)和氯化钾(0.154mol/L)。蔗糖为经典亚细胞组分分离研究所选用,而氯化钾更适合外源化学物代谢酶的研究,如它可更有效除去微粒体制备物中的血红蛋白,减少光谱测定的干扰。匀浆介质在使用前应将pH调至7.4左右。匀浆缓冲液可含有5~50mmol/L的Tris或Hepes。 大多数研究中常用的匀浆缓冲液为含0.154mol/L KCl的50mmol/L Tris•HCI缓冲液,pH7.4。总有机碳在线分析仪此缓冲液在4℃条件下,至少贮存12周不变质。在破碎前总有机碳分析仪欧洲杯滚球,材料常需要预处理,如动物材料要除去与实验无关甚至有妨碍的结缔组织,脂肪组织和血污等,植物种子需要除壳,微生物材料需将菌体和发酵液成分分开等。 对同一实验材料,由于实验要求不同,采用的破碎方式也存在一定差异,如提取中的核酸和提取其中的核苷酸,前者必须保持十分温和的条件,以保持分子的完整性;后者可采用强烈手段。 不同实验规模、不同实验材料和实验要求,使用的破碎方法和条件也不同。

       一些坚韧组织,如肌肉、植物的根茎等,常需要强烈的搅拌或研磨作用,才能把其组织细胞破坏。而比较柔软的组织如肝、脑等,用普通的玻璃匀浆器即可达到完全破坏细胞的目的。机械法:主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法,常用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等。 常用的细胞破碎方法有反复冻融法、超声破碎法、酶处理法、自溶法和表面活性剂处理法 。 细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤,破碎方法的得当与否,直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。实验室对组织细胞的破碎方法很多,有机械方法总有机碳分析仪、物理方法、化学方法和生物化学方法等。动物肝脏中dna的提取中称取猪肝8g匀浆器,为什么要用匀浆器磨碎 1. 称取猪肝8g,用匀浆器磨碎(冰浴),加入相当于2倍肝重的0.1mol/L NaCl-0.05mol/L柠檬酸钠缓冲液,研磨三次,然后倒出匀浆物,匀浆物在4000r/min 下离心10min;沉淀中再加入25ml缓冲液,于4000r/min 离心20min;取沉淀. 2. 在上述沉淀中加入40ml 0.1mol/L NaCl-0.05mol/L柠檬酸钠缓冲液、20mlCHCl3-异戊醇混合液、4ml 5% SDS使其终浓度为0.41%,振摇30min,然后缓慢加固体NaCl,使其浓度为1mol/L(约3.6g).将上述混合液在3500r/min离心20min,取上清水相.



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